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核酸提取純化系統(tǒng)實(shí)際應(yīng)用時(shí)的常見問題分析

更新時(shí)間:2022-10-25      點(diǎn)擊次數(shù):1410
   核酸提取純化系統(tǒng)是通過細(xì)胞裂解液裂解樣本,從樣本中游離出來的核酸分子被特異的吸附到磁性顆粒表面,而蛋白質(zhì)等雜質(zhì)不被吸附而留在溶液中,在磁場作用下,使磁性顆粒與液體分開,回收顆粒(即磁珠-核酸混合物),再用洗脫液洗脫即可以得到高純度的核酸。
  核酸提取純化系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)重復(fù)性、穩(wěn)定性好,操作簡單,觸屏可視化界面。體積小巧、運(yùn)輸方便、占據(jù)實(shí)驗(yàn)空間小。專業(yè)的結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),儀器運(yùn)行接近靜音。操作軟件設(shè)計(jì)通用性強(qiáng),可適合各廠家提取試劑盒。內(nèi)置電池,在突然斷電情況下仍然可以繼續(xù)運(yùn)行。一次性磁棒套、紫外滅菌燈及排氣系統(tǒng)(HEPA)的使用,可有效保障環(huán)境和人員的生物安全,并且可有效截留氣溶膠,避免不同批次試劑間的交叉污染。
  核酸提取純化系統(tǒng)實(shí)際應(yīng)用時(shí)的常見問題分析:
  一、提取核酸得率較低
  1.樣品量與試劑的配比要控制在一定范圍,避免超過裂解能力。
  2.破碎研磨的步驟處理細(xì)節(jié)很重要,一定要充分研磨,這是核酸提取的條件。
  3.在洗脫的步驟,使用足量的洗脫液洗脫并充分混勻,避免有團(tuán)塊殘存。
  4.實(shí)驗(yàn)耗材要匹配,如不同的吸附柱或磁珠的核酸吸附能力不同,也會影響核酸的得率。
  二、提取核酸出現(xiàn)降解
  1.提取的樣品量要符合試劑的配比,盡量控制樣品量達(dá)到合適比例。
  2.每個(gè)步驟都要注意充分的混合均勻,避免團(tuán)塊的殘留影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
  3.在洗脫時(shí),時(shí)間過長或者溫度過高,核酸有可能會降解。
  4.樣本切記不可反復(fù)凍融,提取的樣本要注意在合適的溫度保存,長期保存盡量-80℃。
  三、提取核酸純度不高
  1.樣本量和裂解液等試劑的配比要盡量控制到合適的范圍。
  2.混合均勻以確保裂解充分和沒有團(tuán)塊殘留。
  3.晾干的步驟要充分,否則可能會導(dǎo)致醇類等雜質(zhì)的殘留。
  4.磁棒振蕩幅度太小或混合時(shí)間太短,磁珠上有雜質(zhì)殘留會影響磁珠吸附核酸的能力。
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